青楼妓女禁脔道具调教sm_久久精品动漫一区二区三区_国产l精品国产亚洲区久久_亚洲国产美女精品久久久_在厨房拨开内裤进入在线视频

咨詢熱線
13601810619
ARTICLE/ 技術(shù)文章
首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  液相色譜法測(cè)定天山花楸中的綠原酸含量

液相色譜法測(cè)定天山花楸中的綠原酸含量

更新時(shí)間:2015-01-08瀏覽:1864次

【摘要】   目的建立HPLC 梯度洗脫法測(cè)定天山花楸葉與果中綠原酸含量的方法。方法采用ZORBAS ODS C18 (4.6 mm ×15 cm,5 μm)色譜柱,甲醇-0.02%磷酸溶液為流動(dòng)相(梯度洗脫),流速為1.0 ml· min-1,檢測(cè)波長(zhǎng)為326 nm。結(jié)果綠原酸線性范圍為3.952 ~19.76 μg/ml,葉中綠原酸含量1.982% (RSD=0.58%,n=3),平均回收率為99.42%;果中綠原酸含量2.259% (RSD=1.2%,n=3),平均回收率為99.32。結(jié)論 該方法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、可靠,可用于該藥材的質(zhì)量控制。

  【關(guān)鍵詞】  天山花楸 綠原酸 液相色譜法 梯度洗脫

  Abstract:ObjectiveTo establish methods for determination of chlorogenic acid in Sorbus tianschanica.MethodsThe HPLC system consisted of the column of ODS ZORBAS ODS (4.6 mm ×15 cm,5 μm) column and MeOH -0.02%H3 PO3 as the mobile phase.The flow rate was 1.0 ml· min-1 .The detection wavelength was 326 nm.ResultsThe method was linear within the range of 3.952 ~19.76 μg/ml.Chlorogenic acid in the leaf of S.tianschanica was 1.982%(RSD% =0.58,n=3)and the average recovery was 99.42%. Chlorogenic acid in the fruit of S.tianschanica was 2.259%(RSD% =1.2,n=3) and the average recovery was 99.32%.ConclusionThe method is simple, sensitive, quick and highly reproductive and it is suitable for analysis of chlorogenic acid in S.tianschanica.

  Key words:Sorbus tianchanica;  Chlorogenic acid;  HPLC;  Gradient elution

  薔薇科Rosaceae 花楸屬植物天山花楸Sorbus tianschanica,為維吾爾和哈薩克族民間常用藥材。藥理實(shí)驗(yàn)顯示[1 ~3] ,天山花楸枝葉兼有止咳、平喘、強(qiáng)心等多種藥理功效,并且毒性很低。綠原酸是天山花楸中有效成分之一,廣泛存在于自然界,屬于咖啡??崴嵫苌?,是植物體內(nèi)有氧呼吸過(guò)程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物,為眾多藥材抗菌解毒、消炎利膽的主要有效成分。綠原酸除了抗氧化能力強(qiáng)外,還具有抗艾滋病毒、抗過(guò)敏、抗腫瘤等功能[4 ~7] 。由于天山花楸中的綠原酸定量研究尚未見(jiàn)報(bào)道,為了了解天山花楸中綠原酸的含量,更全面、綜合地評(píng)價(jià)這一藥用植物,更好地控制藥材質(zhì)量,開(kāi)發(fā)傳統(tǒng)中藥材的潛力,我們建立了測(cè)定天山花楸葉與果中綠原酸的液相色譜方法[8,9] 。

  1  儀器與試藥

 ?。粒纾椋欤澹睿?HP1100 型液相色譜系統(tǒng),配有:四元泵,紫外檢測(cè)器,HP1100 化學(xué)工作站;日本島津UV 2401(PC)紫外光譜儀;德國(guó)Sartorius BP211D 十萬(wàn)分之一電子分析天平;索氏抽提裝置;甲醇為色譜純,水為二次重蒸水,其他試劑均為分析純;天山花楸供試品自制;綠原酸對(duì)照品由中國(guó)藥品生物檢定所提供。

  2  方法與結(jié)果

  2.1  色譜條件色譜柱為ZORBAS ODS C18 (4.6 mm ×15 cm,5μm)色譜柱,檢測(cè)波長(zhǎng)為326 nm;柱溫35℃;流速1.0 ml·min-1 ;進(jìn)樣量20 μl。流動(dòng)相洗脫梯度見(jiàn)表1。

  表1  流動(dòng)相梯度洗脫(略)

  2.2  對(duì)照品溶液和供試品溶液制備

  2.2.1  綠原酸對(duì)照品溶液稱取綠原酸對(duì)照品約20 mg,精密稱定,置100 ml 棕色容量瓶中,甲醇溶液稀釋至刻度,作為貯備液。精密吸取貯備液5 ml,置25 ml 棕色容量瓶中,加甲醇溶液至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液。

  2.2.2  天山花楸葉供試品?。叮?℃常壓干燥至恒重天山花楸葉粉末約0.5 g,各3 份,置索氏提取器中,加乙醚約80 ml,加熱回流至無(wú)色,棄去乙醚,藥渣揮干,再加甲醇80 ml,加熱回流提取至無(wú)色,轉(zhuǎn)移至100 ml 容量瓶中,甲醇定容,即得待測(cè)天山花楸葉供試品溶液。

  2.2.3  天山花楸果供試品?。?份60 ℃常壓干燥至恒重的天山花楸果實(shí)粉末約0.5 g,置索氏提取器中加甲醇80 ml,加熱回流提取至無(wú)色,移至100 ml 容量瓶中,甲醇定容,即得待測(cè)天山花楸果供試品溶液。

  2.3  線性關(guān)系考察及穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密移?。保?,2.0,3.0,4.0,5.0  ml 綠原酸對(duì)照品溶液,分別置10 ml 棕色容量瓶中,用0.45 μm 濾膜過(guò)濾,收集續(xù)濾液,進(jìn)樣量20 μl,按上述色譜條件測(cè)定。以基線構(gòu)成之面積稱峰面積。A=×σ×h=2.507σh=1.064 Wh/2h>峰面積A 對(duì)對(duì)照品濃度(μg/ml)進(jìn)行線性回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程:A=46.107C-59.532,r=0.999 6。綠原酸線性范圍為3.952 ~19.76 μg/ml。取上述對(duì)照品溶液,每隔2 h 按上述色譜條件測(cè)定峰面積,結(jié)果表明在12 h 內(nèi)基本穩(wěn)定(RSD=2.8%)。

  2.4  精密度實(shí)驗(yàn)精密移取對(duì)照品液2.0 ml,置10 ml 棕色容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,照“2.3”項(xiàng)下進(jìn)樣,連續(xù)進(jìn)樣5 次,綠原酸含量RSD=2.7%。

  2.5  重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精密量取已知綠原酸含量的葉與果供試品溶液0.8 ml,移至10 ml 棕色容量瓶中,甲醇定容,照“2.3”項(xiàng)下進(jìn)樣,連續(xù)進(jìn)樣5 次,葉的綠原酸含量RSD=2.8%;果的綠原酸含量RSD=0.74%。

  2.6  回收率實(shí)驗(yàn)精密移取已知綠原酸含量的樣品0.8ml,置10 ml 棕色容量瓶中,精密加入定量低、中、高濃度的對(duì)照品液,加甲醇稀釋至刻度,照“2.3”項(xiàng)下操作測(cè)定。葉:平均回收率=99.42%,RSD=2.1%(n=9);果:平均回收率=99.32%,RSD=2.4%(n=9)。

  2.7  樣品測(cè)定精密量取供試品溶液0.8 ml,移至10 ml 棕色容量瓶中,甲醇定容,照“2.3”項(xiàng)下進(jìn)樣,代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,即得。結(jié)果:天山花楸葉中綠原酸的平均含量為1.982%, RSD =0.58%(n=3);天山花楸果中綠原酸的平均含量為2.259%,RSD=1.2%(n=3)。見(jiàn)圖1。

  圖1  綠原酸HPLC 色譜圖(略)

  3  討論

  對(duì)照品綠原酸對(duì)其進(jìn)行紫外掃描,綠原酸在326 nm 有較強(qiáng)吸收,因此選擇326 nm 為測(cè)定波長(zhǎng)。

  曾選擇甲醇-0.02%磷酸溶液(10∶90)的等度洗脫色譜條件,但綠原酸保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng),tR 為14 min, 一次檢測(cè)完成約需30min。經(jīng)摸索后采用梯度洗脫,使待測(cè)組分綠原酸以較短時(shí)間tR為4.4 min 出峰,隨后使洗脫梯度變大,流動(dòng)相的極性也變大,極性弱的組分快流出柱。

  【參考文獻(xiàn)】

 ?。?] 李迪民.天山花楸水提液藥理學(xué)研究[ J].中草藥,1995,26(6):302.

  [2] 李迪民,陳 堅(jiān).天山花楸醇提取物藥理作用的研究[J].西北藥學(xué)雜志,1999,14 (1):14.

 ?。?] 于 明,李 銑.花楸屬植物化學(xué)成分藥理作用及其研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,6(5):364.

  [4] 高錦明,張鞍靈,張康健,等.綠原酸分布、提取與生物活性研究綜述[J].西北林業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào),1999,14(2):73.

 ?。?] 張鞍靈,馬 群,高錦明,等.綠原酸及其類似物與生物活性[J].中草藥,2001,32(2):173.

 ?。?] 胡克杰,孫考祥,王憬璐,等.綠原酸體外抗病毒作用研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2001,35(6):430.

 ?。?] 尉 芹,馬希漢.綠原酸及其提取分離方法評(píng)述[J].中成藥,2001,23(2):135.

 ?。?] 解成喜,張麗靜,范維剛.反相液相色譜法測(cè)定羅布麻葉中綠原酸的含量[J].分析實(shí)驗(yàn)室,2006,25(2):16.

 ?。?] 李建中,馬 良,崔 同,等.山楂果實(shí)中主要活性物質(zhì)的液相色譜分析[J].色譜,2005,23(1):11.


本篇文章來(lái)源于 液相色譜法測(cè)定天山花楸中的綠原酸含量|科學(xué)儀器在線

聯(lián)系電話:
021-51001666
13601810619

在線微信掃碼咨詢

无码熟妇人妻av影片在线| 午夜精品久久久久久久久| 国产亚洲精久久久久久无码77777| 欧美性性性性性色大片免费的| 久久亚洲精品无码aⅴ大香| 精品久久久久国产免费| 色屁屁www影院免费观看入口| 国产一区二区三区四区精华| 中文字幕丰满伦子无码| 中文字幕人成人乱码亚洲电影| 国产人妻丰满熟妇嗷嗷叫| 国产嫖妓一区二区三区无码| 99久久人妻精品免费二区| 国产欧美日韩a片免费软件| 国产精品无码久久久久久| 黑森林福利视频导航| 无码av在线一本无码| 亚洲国产精品无码成人片久久| 亚洲欧美一区二区成人片| 色一情一乱一伦一区二区三区日本| 精品一区二区三区免费视频| 日韩精品一区二区三区中文| 久久午夜夜伦鲁鲁片免费无码影视| 精品一区二区三区av天堂| 国产麻豆精品精东影业av网站| 国产精品久久久久国产a级| 人妻少妇精品中文字幕av| 亚洲色成人网站www永久| 人妻在厨房被色诱 中文字幕| 久久成人国产精品免费软件| 精品久久久久久久无码人妻热| 亚洲熟妇色自偷自拍另类| 国产乱子伦农村叉叉叉| 欧美多人片高潮野外做片黑人| 毛片24种姿势无遮无拦| 三级4级全黄60分钟| 国产特级毛片aaaaaaa高清| 处破痛哭a√18成年片免费| 无码国产一区二区三区四区| 成熟女人毛片www免费版在线| 用舌头去添高潮无码视频|