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液相色譜儀測定腎康注射液中原兒茶醛含量

更新時間:2009-09-27瀏覽:1862次

在所有色譜技術(shù)中,液相色譜法(liquid chromatography,LC)是zui早(1903年)發(fā)明的,但其初期發(fā)展比較慢,在液相色譜普及之前,紙色譜法、氣相色譜法和薄層色譜法是色譜分析法的主流。到了20世紀(jì)60年代后期,將已經(jīng)發(fā)展得比較成熟的氣相色譜的理論與技術(shù)應(yīng)用到液相色譜上來,使液相色譜得到了迅速的發(fā)展。特別是填料制備技術(shù)、檢測技術(shù)和高壓輸液泵性能的不斷改進(jìn),使液相色譜分析實現(xiàn)了化和高速化。具有這些優(yōu)良性能的液相色譜儀于1969年商品化。從此,這種分離效率高、分析速度快的液相色譜就被稱為液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC),也稱高壓液相色譜法或高速液相色譜法。
  氣相色譜只適合分析較易揮發(fā)、且化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的有機(jī)化合物,而HPLC則適合于分析那些用氣相色譜難以分析的物質(zhì),如揮發(fā)性差、極性強(qiáng)、具有生物活性、熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)?,F(xiàn)在,HPLC的應(yīng)用范圍已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過氣相色譜,位居色譜法。

液相色譜的類型


  廣義地講,固定相為平面狀的紙色譜法和薄層色譜法也是以液體為流動相,也應(yīng)歸于液相色譜法。不過通常所說的液相色譜法僅指所用固定相為柱型的柱液相色譜法。

  通常將液相色譜法按分離機(jī)理分成吸附色譜法、分配色譜法、離子色譜法和凝膠色譜法四大類。其實,有些液相色譜方法并不能簡單地歸于這四類。按分離機(jī)理,有的相同或部分重疊。但這些方法或是在應(yīng)用對象上有*之處,或是在分離過程上有所不同,通常被賦予了比較固定的名稱。


表8-1 HPLC按分離機(jī)理的分類

類 型 主要分離機(jī)理 主要分析對象或應(yīng)用領(lǐng)域
吸附色譜 吸附能,氫鍵 異構(gòu)體分離、族分離,制備
分配色譜 疏水分配作用 各種有機(jī)化合物的分離、分析與制備
凝膠色譜 溶質(zhì)分子大小 高分子分離,分子量及其分布的測定
離子交換色譜 庫侖力 無機(jī)離子、有機(jī)離子分析
離子排斥色譜 Donnan膜平衡 有機(jī)酸、氨基酸、醇、醛分析
離子對色譜 疏水分配作用 離子性物質(zhì)分析
疏水作用色譜 疏水分配作用 蛋白質(zhì)分離與純化
手性色譜 立體效應(yīng) 手性異構(gòu)體分離,藥物純化
親和色譜 生化特異親和力 蛋白、酶、抗體分離,生物和醫(yī)藥分析


液相色譜儀流程圖

 

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